層流手術潔凈室的環境和落菌日常檢測只有動態和靜態空氣采樣兩種方式，下面介紹層流手術室(無塵室)靜態空氣采樣檢測法。
1、層流手術室(無塵室)靜態空氣采樣方法：
（1）在無塵室當送風口集中布置時，應對手術區和周邊區進行分別檢測；當送風口分散布置時，按全無塵室統一布點方法檢測。
（2）落菌沉降法采樣時，用直徑9cm的培養皿，在空氣中暴露30分鐘，37℃培養24h，培養皿中的菌落數（cfu）代表空氣中沉降下來的細菌數，以個/皿表示。
（3）落菌浮游法采樣時，用裂隙采樣器在空氣中隨機采樣30分鐘，對采樣皿或采樣條培養得出的菌落數（cfu），代表空氣中浮游下來的細菌數，以個/m3表示。
2、落菌（fungus)采樣高度：
（1）采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；
（2）在手術區檢測時應無手術臺；當手術臺已固定時，檢測高度應在臺面之上0.25cm。
3、布點方法：（見下圖）
4、落菌采樣注意事項：
（1）在100級無塵區域檢測時，采樣口應對著氣流流動方向；在其他區域檢測時，采樣口均向上；
（2）采樣后的培養基條或培養皿，應37℃條件下培養24h，并計算菌落數，菌落數的平均值（The average value)均四舍五入選位到小數點后1位；
（3）每次落菌（fungus)采樣時間不應小于30分鐘。
（4）不論用何種方法檢測細菌濃度，都必須有兩次空白對照。第一次用于檢測培養皿或培養基條（每批一個對照皿（條））；第2次對操作過程做對照試驗（每室或每區將1個對照皿（條），打開后又立即封蓋，進行模擬(定義:對真實事物或者過程的虛擬)操作）；兩次對照結果必須為陰性，整個操作過程應符合無菌操作的要求。
（5）特別提示在:新房驗收時，應最后做空氣、物表特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛檢測。
潔凈手術室靜態（空態）空氣采樣方法（沉降法）對照表
5、層流手術室環境細菌濃度和靜壓差日常監測（Food Monitor)：
根據最新GMP標準，層流手術室的設計建造標準越來越高，因此對層流手術室的日常環境管理和檢測要每天都進行，保障術前術后的有效正常運行。下面介紹手術室的日常監測方法：
6、層流手術室空氣日常監測（Food Monitor)方法：
要求日常實行動態監測（Food Monitor)，必測項目為平板采樣法（落菌沉降法）或采樣器法(浮游菌法)檢測細菌菌落總數。
（1）回風口動態平板采樣法：應在手術開始、手術2小時、手術結束前抽檢3-4次。每個回風口中部擺放3個傾斜30℃，Φ90培養皿，暴露30分鐘后，37OC培養24小時。
標準：每皿菌落計數平均值應符合表4標準要求。單皿最大值不應超過平均值3倍。
（2）動態采樣器法：浮游菌菌落檢測應在手術進行如切皮、縫合、連臺手術之間、手術進行4小時等，選擇不少于3個程序，測定細菌菌落總數。
標準：I級<30cfu/m3；II級<150 cfu/m3；III級<450 cfu/m3；IV級<500 cfu/m3。靜壓差因為潔凈室的環境是一個密閉的潔凈環境，門關閉時室內的氣壓大于室外的氣壓，從而保證潔凈室內的潔凈空氣只能向室外流動，室外的空氣不會進入室內，開門后就破壞了壓差系統，潔凈間的凈化質量也將受到影響。
（3）其他潔凈用房在當天上午10時和下午4時各測1次，在每個回風口中部擺放3個Φ90培養皿，沉降0.5h后在37℃下培養24h。
標準：同回風口動態平板采樣法標準。
（4）采樣次數：按出臺的潔凈手術部醫院管理控制標準執行。
7、表面染菌（fungus)密度監測方法：
（1）采樣時間：消毒后10分鐘之內（各類潔凈用房，作為靜態實測數據）、各手術室手術結束后和各類潔凈用房的上午10時。
（2）采樣地點：有代表性地點，每個房間每種表面不少于2點（如手術臺、桌、燈等）。
（3）采樣及檢測方法：按照《醫院消毒衛生標準》（GB15982-1955）。
（4）標準：同回風口動態平板采樣法標準。
8、醫護人員手采樣：每次抽檢人數不少于3人
9、靜壓差監測（Food Monitor)方法：pa（帕）
（1）方法：儀器測定法。
（2）儀器：液柱式微壓計，最小刻度（Scale)2Pa。
（3）人員：一人持測定膠管并復核，一人操作儀器（appliance）。
A、關門：應把潔凈區域內所有的門關閉，最好有人守護。
B、測定：從手術室最里面潔凈級別最高的房間依次向外測定，凡是可相通的相鄰兩室都要測定，一直測到可與室外相通的房間。應有一人在待測房間手持伸入該房間的膠管，使管口處于0.8m高度，管口端面垂直于地面，避開氣流方向和渦流(又稱:傅科電流) 區。
C、檢查：如果靜壓太小，不易判斷正負，可用線頭之類放在門縫外觀察。凈化車間檢測 濕度45－65%；GMP粉劑車間濕度在50%左右為宜；電子車間濕度略高以免產生靜電。噪聲≤65dB（A）；新風補充量是總送風量的10%－30%；照度300LX。
D、調節：如發現測出的壓差未達到要求，可調節風口或閥門(作用:控制部件)開關重測。
（5）監測標準 ：I、II級> 8pa；III、IV級> 5 pa；潔凈區對非潔凈區>10 pa。
（6）測定次數：根據需要隨時檢測并留有記錄。
10、相對濕度監測（Food Monitor)：
夏季：不得連續2天>60%，不得發生2次以上。靜壓差由于層流流量計適用于層流流動狀態，從流體力學的角度分析是適用于低雷諾數下的流動。流 體在流動過程中粘性力占主導地位。 由于粘性力的影響，流體在流動過 程中將造成壓力能的損耗，使壓力 下降。在穩定流動過程中，流體的壓力損失與流體粘度及流量之間存在固定的關系。
冬季：不得連續（Continuity)2天<30%。不得發生2次以上。
綜上所述：一般層流手術室對環境要求較高，因此必須對層流手術室的特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛濃度、靜壓差等指標（target aim)性的常規項目進行日常監測，以保證層流手術潔凈室能正常安全有效運行。
